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La technique employée pour le séquençage est la technique de Sanger utilisant des didésoxyribonucléotides (ddNTPs). Cette technique est basée sur la synthèse d'un brin d'ADN par une polymérase et par l'incorporation aléatoire de ddNTPs, chacun marqué par des fluorophores de 4 couleurs différentes. L'incorporation de ddNTPs entraînera l'arrêt de l'extension de la chaîne nouvellement synthétisée par leur manque du groupement OH en 3'. Les fragments d'ADN marqués de tailles différentes sont séparés sur un gel de polyacrylamide (Figure 2.4Schématisation du principe du séquençage).
anouar
2009-08-22